
分子诊断相关服务:荧光定量PCR
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荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团(或染料),利用计算机实时检测整个PCR进程中荧光信号的变化,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法,可对mRNA及DNA等进行荧光定量PCR的检测,可进行绝对定量和相对定量检测。
服务内容:
1) 根据客户提供的基因名查找序列,设计并合成引物(需要用探针法时也合成探针,根据客户要求可进行各种探针设计);
2) 对客户提供的样本进行总RNA或DNA的抽提,并通过紫外检测和琼脂糖凝胶电泳检测RNA或DNA的质量;
3) 对于RNA样品,通过逆转录反应将RNA逆转录成cDNA;
4) 利用阳性模板或小样本建立PCR-荧光方法并优化;
5) 制备标准曲线样品;
6) 标准曲线样品和待测样品都进行PCR-荧光扩增和检测;
7) 检测结果进行标准曲线分析;
8) 提供实验报告:包括详细的实验方法及实时荧光定量PCR实验结果的相关图表。
客户须知及标本要求:
1) 客户须明确具体的检测目的,提供详细的背景资料,如DNA/RNA来源、丰度等,最好提供1~2篇文献;
2) 客户需提供新鲜的且尽量多的材料(组织或细胞等),或直接提供纯化好的总RNA或DNA(大于5ug/样品)。组织样品每份材料应提供100mg以上,细胞标本细胞数应达到1×106~1×107,用于RNA提取的样品取材后应液氮速冻,-80℃保存,用干冰低温运输送检;
3) 请通过E-mail提供需检测的基因名称,最好能提供基因序列,包括基因在基因组上的DNA序列或转录后的mRNA序列;